张桂红：猪蓝耳病研究最新进展

　　张桂红：消灭传染源，切断传播途径，保护易感群体依然是防控蓝耳病的关键

　　

　　华南农业大学张桂红教授介绍了在墨西哥的坎昆召开的第23界国际猪兽医大会一些概况，在出席的50多个国家中，中国出席人数占了与会人数的15.7%，大会决定第24届国际猪兽医大会在爱尔兰都柏林召开，第25届国际猪兽医大会在中国重庆召开，说明了中国养猪业在世界养猪业中占有相当的分量。世界猪病大会关注焦点，热点是：PED、PRRSV、PCV、SIV；亮点是： PED、非洲猪瘟；关注最新的重要疾病爆发情况，包括美洲和亚洲猪流行性腹泻（PED）、中国台北狂犬病、东欧非洲猪瘟 。

　　

　　在PRRS方面，张老师提出，PRRSV有不同的毒株，存在生物学和遗传学差异(McAb表面不同抗原性)，有不同的临床表现。我国 PRRSV 毒株呈多样性，经典毒株主要发生在1996年，高致病性毒株（ HP-PRRSV）主要在2006年暴发，欧洲株野毒株2009年被检测到。从2010-2013年间华南区1501份组织样品，7178血清样品检测PRRS抗原、抗体，可以看到随着免疫力度的增加(血清抗体阳性率)，组织样品中PRRSV的检出率在下降，说明免疫PRRS疫苗对控制PRRS是有效的。2010-2013年间PRRSV GP5及Nsp2 同源性分析：GP5在4年间的同源性临床上分离的毒株为91-100%，与JXA1株间的同源性在94.5-95%，CH-1a同源性为90-99.5%，TJ株同源性为94.5-99.5%，HuN4株同源性为94.5-99.5%；Nsp2 在4年间的同源性，临床上分离的毒株为80-100%，与JXA1株间的同源性在82.3-98.5%，CH-1a同源性为85.8-89.3%，TJ株同源性为80.8-97.8%，HuN4株同源性为80.8-97.1%。

　　

　　PRRSV ORF5序列测定意义，对不同的场，意义不同，通常情况下，我们可以通过测序，及时了解PRRSV的流行情况。对部分PRRSV-ORF5无法扩增检测机构，要注意由于变异，需要不断改变引物。能否通过测序选择哪种蓝耳疫苗？暂时不知。

　　

　　研究发现，GP5是PRRSV的主要囊膜糖蛋白，是诱发机体产生中和抗体的主要结构蛋白。GP5序列和抗原性在北美洲型和欧洲型间存在明显差异。利用特异性位点血清抗体来研究PRRSV抗原表位特性，结果发现有21个抗原表位具有诱导抗体产生的能力 。Nsp2基因中含有6个B细胞表位，可以被感染宿主的免疫系统所识别；还含有T细胞表位。Nsp2编码区近3 kb，其两端在不同毒株之间高度保守，而中间变异性很高，不仅仅是点突变，也有核苷酸的缺失和插入。通过人工血清驯化，可以让某优势毒株占据猪场，从而减少变异几率。

　　

　　PRRSV从猪体排毒时间随部位不同而不同，如鼻腔分泌物可持续21天，唾液42天，精液92天，最长的扁桃体排毒时间可长达175天等，国外目前有些猪场通过让猪咬棉绳采集口腔液体，或用棉棒采采公猪耳血的方法做PRRS病毒检测。

　　

　　是否进行PRRS疫苗免疫，或如何免疫疫苗，需要了解猪场PRRSV感染状况，通过对不同PRRSV感染状态猪群的PRRSV抗体血清状况，可以把猪场分为：阴性猪场、稳定/不活动猪场、稳定/活动猪场、不稳定猪场。生产成绩方面要了解：死胎和木乃伊的比列极速上升、哺乳仔猪的死亡率 、保育猪的死亡率…… 

　　

　　仔猪对PRRSV不存在先天性的免疫力，PRRSV强毒对猪肺巨噬细胞的感染随日龄的增加而降低。对于疫苗免疫后为什么会发病？如何选择疫的问题，张老师认为是一个复杂的问题，但美国明尼苏达大学的Murtaugh教授表示：PRRS疫苗并不能完全控制PRRS，但预防性免疫能够在猪群暴发疾病时减轻疾病的传播并提高猪群生产成绩。美国明尼苏达大学的Tim Loula教授也表示：疫苗免疫可以减少PRRSV排毒时间，从70天减少到20 （45天？），但目前市场上的PRRS疫苗都不够好。但最近，美国堪萨斯州立大学Jishu Shi博士的试验指出，JXA1株弱毒疫苗能控制国外的PRRS。

　　

　　猪感染PRRSV后，中和抗体产生较晚，对它的作用存在争议：将具有中和活性的单抗或多抗血清注射到猪体内，能够降低或消除病毒血症；一些疫苗能起到保护作用与中和抗体的出现有关。由于中和抗体的出现较晚，且效价较低，其作用有限；有报道感染PRRSV的猪体内产生较高水平的中和抗体后，但仍能检测到病毒血症，认为其并不能清除病毒。

　　

　　经典PRRS和HP-PRRS活疫苗株诱导中和抗体水平的比较，HP-PRRSV活疫苗株HuN4-F112免疫后，猪体能产生较高水平的中和抗体；经典PRRSV活疫苗株CH-1R免疫后只能诱导产生较低水平的中和抗体；HuN4-F112免疫猪血清对CH-1R的交叉中和作用以及CH-1R免疫猪血清对HuN4-F112的交叉中和作用均较差。PRRSV ORF1a区基因在病毒诱导猪体内中和抗体中发挥关键作用。

　　

　　在PRRS的控制方面，有效控制其他病原如PCV2是非常重要的，台湾屏东科技大学的钟文彬教授指出，猪只体内PRRSV与PCV2交互作用，会导致：1. TLRs 2, 4 及 8 表达上升，分泌大量促发炎细胞激素 IL-1，导致严重呼吸症狀；2. TLRs  3、 7 及 9 下降，減少IFN-α分泌，延续有效免疫反应的产生；3. IL-10分泌 上升， TNF-α分泌減少，逃避宿主的免疫反应，病毒持续繁殖。当前蓝耳病防控难点就是，PRRSV有很多种亚型，而且到底怎么分型还不能准确知道；第二，病毒多次感染以后就可能导致基因变异，在猪场产生新的病毒。当然美国明尼苏达大学教授朱汉守也指出：PRRS清除并不难，但是净化的关键在于以后如何继续保持阴性，防止重新再感染。蓝耳病防控要非常注重生物安全，关键是，消灭传染源，切断传播途径，保护易感群体。