前段时间，我们发布了一篇关于猪瘟净化的文章（不了解的朋友可以也回顾一下“非常关键，养猪人又省一笔疫苗钱！终于可以早点实现不打猪瘟疫苗了！”），引起了大家的广泛关注，也表明了养猪人对净化猪瘟的强烈需求。

就像之前的文章所说：养猪不能陷于永无休止的打疫苗循环中，不能“以针头为乐”，因此不能让新病不断、老病难除的趋势持续发展下去，所以，我们养猪最终还是要消灭掉一些疾病，譬如当前的猪瘟......

同时，备受行业瞩目、直指猪瘟净化的“猪瘟E2基因工程亚单位疫苗-天瘟净”，也已经上市了4个多月。那么，关于这个净化猪瘟的新武器，我们怎样才能用好？为此，养猪信息网采访了天康生物股份有限公司（以下简称“天康生物”）曾容愚博士。

曾容愚，南京农业大学动物营养学硕士和预防兽医学硕士；美国马里兰大学免疫学博士。于Nature Biotechnology, PNAS, The Journal of Immunology等期刊发表SCI论文多篇；在APVS、IPVS、Leman China等重要会议上就猪瘟、蓝耳病、伪狂犬、副猪、萎缩性鼻炎、母源免疫力等主题演讲多次并兼翻译。在动物疫苗尤其是亚单位疫苗研发、生产工艺改进和市场推广等领域都有着深厚的理论功底和丰富的实际经验，2014年原创性地提出了伪狂犬防控“三剑合一”免疫策略；2017年提出蓝耳病“夹心法”免疫新思路；目前专注于猪瘟净化新思路的探讨和实践。 

曾容愚博士

一、目前猪瘟流行趋势如何？养殖户对目前的猪瘟存在哪些误解？

猪瘟是由猪瘟病毒（classical swine fever virus, CSFV）引起的一种高度接触性猪的烈性传染病，每年给中国和其他许多国家养猪业造成巨大经济损失。虽然中国利用自行研制的猪瘟兔化弱毒疫苗进行大规模免疫控制了猪瘟的大规模流行，但猪瘟仍在中国呈散发流行。临床上典型猪瘟症状少见的原因是因为当前流行毒株的致病力较低，温和型猪瘟较多，症状不典型，或仅表现阶段性高热，致死率和发病率不高。

部分养殖户对猪瘟防控和净化的认识上存在误区，大致有以下几个方面：

1、猪瘟的判断主要靠临床症状和病理解剖特点。看不见这些症状，就没有猪瘟。理论上来看猪瘟会引起猪体呼吸道、消化道、生殖道三大系统全方位、多层次的感染。但是，临床上猪瘟感染的猪群只表现部分上述临床症状，所以，很容易被误判为其他疾病，比如呼吸道问题容易被当做蓝耳或者圆环处理，繁殖障碍容易被当做伪狂犬或者蓝耳对待，消化道问题容易被当做PED或者细菌性腹泻对付。

2、临床型猪瘟时有发生，但是用户认为猪瘟苗是万能的，打了就有效，能够雪中送炭，将损失降到最低。其实现有的C株疫苗固然好，但是在应用层面并不完美，而且猪瘟病毒感染的猪再打猪瘟疫苗是没有效果的。

3、看不见猪瘟存在比例如何，基层诊断评估方法有待完善。一方面，部分实验室连续多年猪瘟病原检出率逐年降低。另一方面，部分实验室病原检出率低可能与当前检测方法不准确有关，实验室检测用引物大多不能直接区分野毒与疫苗毒，而且扩增区域常为突变较少的基因片段，存在误判情况（错把野毒当疫苗毒）。

4、 认为即便有看不见的猪瘟，其对猪场的经济效益没有影响。对猪瘟的防控满足于“有病不成灾，有疫不成群”的状态，对更好的防控策略来净化猪瘟可以进一步提高经济效益，心存疑虑，积极性不高。其实，从生物学试验的设计来讲，没有科学的对照（净化场）和比较，造不造成影响你就不清楚，只有猪瘟净化那天你才能知道猪瘟给你造成的损失有多大。

5、对待母猪带毒的后果没有引起足够的重视。只知道母猪带毒会引起繁殖障碍，很少意识到母猪带毒等同于仔猪先天感染；而且C株疫苗无法彻底阻止母猪带毒和仔猪先天性感染，猪群间歇性排毒时有发生，当遇到抗体阴性猪时，就会导致猪瘟感染。

6、对待抗体阴性猪和阳性猪的解读不够警觉，不够科学严谨。因此，猪场对于抗体阴性猪出现原因往往放在首免时间过早、母源抗体干扰大、疫苗头份不够、员工免疫操作不当、猪群免疫时存在免疫抑制性疾病蓝耳或者圆环的感染、饲料中存在霉菌毒素污染等方面，很少有人认识到抗体阴性猪很可能是猪瘟野毒株感染的猪。

现有猪瘟活疫苗免疫背景下的部分母猪和仔猪不可避免会出现抗体阴性猪：母猪在后备、高胎次、临产前等三个阶段容易出现部分阴性猪；仔猪在首免、二免、上市等三个阶段容易出现部分抗体阴性猪。猪瘟野毒未被净化前，即便是抗体高的猪，也不能排除是猪瘟野毒感染猪，除非通过病原学检测来逐头排除。

二、能否详细的介绍猪瘟E2疫苗的独特之处？

猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒灭活疫苗（Rb-03株）是应用现代分子生物学技术将猪瘟病毒E2基因重组于杆状病毒内，在昆虫细胞上培养表达猪瘟病毒E2蛋白而制成的新型基因工程疫苗。天康生物在国内率先完成了昆虫细胞1,000L生物反应器悬浮培养放大工艺，采用无血清全悬浮培养工艺制备E2重组蛋白，进一步纯化后与进口佐剂乳化配苗。数百家临床使用E2的猪场一致反馈，该产品能够有效解决目前猪瘟疫苗免疫后存在的“一波三折，鱼龙混杂”等不足，为猪瘟净化提供一条简便可行的新思路。

猪瘟病毒E2重组杆状病毒疫苗与目前使用的猪瘟兔化弱毒疫苗相比，其主要特点如下：

1、 国内首个猪瘟DIVA灭活疫苗，可用于鉴别诊断，能区分猪瘟野毒感染和疫苗免疫动物。

2、不存在因突变或与野毒发生重组使其毒力返强的危险，具有良好的安全性。

3、采用无血清全悬浮培养工艺制备E2重组蛋白，避免外源病毒的污染和异源蛋白的引入，免疫应激小；进口佐剂乳化配苗，副反应小，免疫期长。

4、有效抗原含量高，诱导机体产生的抗体水平更加整齐。

5、对妊娠母猪安全，能为仔猪提供高水平的母源抗体，可持续70～84日；且仔猪免疫E2不受母源抗体的影响。

三、灭活苗与活疫苗抵抗猪瘟野毒到底哪个更合适？

活疫苗免疫存在免疫耐受及抗体干扰的问题，疫苗免疫时猪群健康状态的干扰等问题。比如临床中保育猪免疫蓝耳后14-21日免疫猪瘟，两种病毒病均属于免疫抑制病，研究表明存在较大的免疫干扰问题，免疫蓝耳后再免疫猪瘟，往往猪瘟抗体较差。相反，E2亚单位疫苗无论在母猪还是仔猪免疫时，抗体的存在对其效果的干扰很小；同时其不受蓝耳活疫苗免疫或者蓝耳病毒感染等因素干扰。简单来说，临床应用上，E2相对于活苗，优势明显。

四、猪瘟E2疫苗对于抵抗猪瘟野毒攻击的保护结果如何？免疫保护期多长？

本实验室进行了不低于20次效力检验攻毒试验，同时申报期间委托第三方进行了3次攻毒试验。结果表明，猪瘟E2亚单位疫苗免疫后，用猪瘟强毒（石门株）攻毒，猪不表现临床症状且体内病毒快速清除，并可产生可靠的临床保护和病原学保护，完全抵御猪瘟野毒感染，攻毒保护效力与C株无差异；最新研究结果表明，E2亚单位疫苗对流行毒株（2.1b、2.1d）100%保护。

试验猪免疫E2亚单位疫苗后14日后开始产生中和抗体，直至免疫后252日中和抗体滴度均不低于1︰32；后备母猪免疫后14日中和抗体逐渐升高，直至免疫后280日中和抗体滴度平均值均不低于1︰32。综合以上结果，为确保疫苗在临床使用的效力将E2亚单位疫苗用于仔猪和母猪的免疫保护期确定为180日。

五、仔猪何时首免？母猪何时免疫？免疫程序应该如何制定？

免疫活疫苗母猪所产仔猪，E2的首免时间与活疫苗一致；免疫E2亚单位疫苗母猪产仔猪，E2的首免时间一般为8-10周。试验结果表明，母猪采用普免或跟胎免疫均可；普免2-3次/年，跟胎免疫可在妊娠56-84日期间免疫一次即可。

六、免疫猪瘟E2疫苗后多久可以鉴别诊断野毒？原理是什么？是否已有完善的检测和操作方法？

鉴别诊断原理是免疫E2亚单位疫苗猪只只能产生E2抗体，未接触过猪瘟活疫苗的猪如果检测到E0抗体，则表示其感染野毒。免疫活苗的猪群，其体内免疫疫苗产生的E0抗体的转阴时间，就是可以清晰判断野毒是否感染的时间。根据我们既有的E0抗体数据，我们推荐以下的检测方案：

根据母猪体内疫苗E0抗体的衰减规律，种猪群换E2疫苗后， E0抗体阳性猪（野毒感染猪）的判断时间点大致为换苗后8个月的每次母猪断奶时；

根据仔猪体内母源的疫苗E0抗体的衰减规律，10周龄仔猪应该转阴。结合后备猪群其他疫病的常用检测时间点，我们建议仔猪免疫E2疫苗后，E0抗体阳性猪（野毒感染猪）的判断时间点包括仔猪10周（有些猪群E0抗体6周就转阴了）、出售种猪时（14-16周）、后备配种前（32周）、头胎母猪断奶时等，可选择其中几个时间点对E0抗体进行检测。

E0抗体检测试剂盒，从我们使用的结果来看，结果稳定、可靠，能够反映野毒的感染事件。野毒病原核酸鉴别诊断建议用能区分猪瘟兔化弱毒疫苗与野毒株的双重实时荧光RT-PCR试剂盒进行检测。

七、使用猪瘟E2疫苗净化猪瘟，应该采取怎样的思路？

使用E2亚单位疫苗净化猪瘟，方向是核心场净化-繁育场-商品场，生产母猪开始全面使用E2疫苗，停用活疫苗，通过加强免疫，提高母猪抗体滴度，从而获得仅具有E2抗体的仔猪，从中选育后备猪，作为猪瘟净化的核心群。待使用E2疫苗6-8个月，监测群体E0抗体阳性率，若降低至5-10%，即可将E0抗体作为母猪淘汰的指标，结合其生产成绩进行选择淘汰。长期使用E2亚单位疫苗的猪场，可将E0抗体作为猪群猪瘟流行性调查的一个重要指标，如果监测到E0抗体阳性猪，提示猪场猪瘟处于感染风险期，需加强免疫，并淘汰疑似带毒猪。

用E2疫苗净化猪瘟的三部曲——免疫-检测-淘汰。简单来说，有齐头并进的两条路线，线路一、种猪群换E2疫苗后，非E2抗体阳性猪（野毒感染猪）的判断时间点大致为换苗后8个月的每次母猪断奶时，此时可对非E2抗体阳性猪（野毒感染猪）进行淘汰；线路二、仔猪免疫E2疫苗后，非E2抗体阳性猪（野毒感染猪）的判断时间点包括仔猪10周、出售种猪时（14-16周）、后备配种前（32周）、头胎母猪断奶时等，可选择其中几个时间点对非E2抗体进行检测，对非E2抗体阳性猪（野毒感染猪）进行淘汰。

使用E2亚单位疫苗只是净化猪瘟的一种捷径，净化猪瘟尤其要关注猪场免疫抑制及垂直传播疫病的循环及感染风险，实时监测，排除感染动物，实现长期的动态净化平衡。所以需根据监测结果，出具猪场疫情风险评估，提示需要重点防控疾病，并制定猪瘟防控和净化方案。